一般操作步驟為先將標本接種于固體培養(yǎng)基上，做分離培養(yǎng)。再進一步對所得單個菌落進行形態(tài)、生化及血清學反應鑒定。培養(yǎng)基常用牛肉湯、蛋白胨、氯化鈉、葡萄糖、血液等和某些細菌所需的特殊物質配制成液體、半固體、固體等。一般細菌可在有氧條件下，37℃中放18～24小時生長。厭氧菌則需在無氧環(huán)境中放2～3天后生長。個別細菌如結核菌要培養(yǎng)1個月之久。

　　由于細菌無處不在，因此從制備培養(yǎng)基使用一次性細菌培養(yǎng)皿時開始，整個培養(yǎng)過程必須按無菌操作要求進行，否則外界細菌污染標本，會導致錯誤結果；而培養(yǎng)的致病菌一旦污染環(huán)境，就會引起交叉感染。